用(yong)Cary60紫(zi)外(wai)可見分(fen)光度法檢測(ce)通過光(guang)催化降(jiang)解(jie)的(de)芳(fang)香標記(ji)物(wu)

用 Agilent Cary 60 紫(zi)外(wai)-可見分(fen)光光度 法檢測(ce)通過光(guang)催化降(jiang)解(jie)

的(de)芳(fang)香標記(ji)物(wu)

應(ying)用(yong)簡(jian)報 化學(xue)

摘(zhai)要

Agilent Cary 60 紫(zi)外(wai)-可見分(fen)光光度計是(shi)革命性(xing) Cary 50 紫(zi)外(wai)-可見分(fen)光光度計的(de)升(sheng) 級(ji)改(gai)良(liang)型(xing)。這(zhe)個(ge)儀器平(ping)臺可以用(yong)來評(ping)估其(qi)潛(qian)在(zai)的消除不必(bi)要

的光漂(piao)白(bai)色標記(ji)的能(neng)力， 這個(ge)應(ying)用(yong)常用(yong)於(yu)普通的紫(zi)外(wai)-可見儀器。在(zai)這篇(pian)簡(jian)短(duan)的綜述中(zhong)，我(wo)們(men)展示(shi)了(le) Cary 60 光(guang)學(xue)元(yuan)件(jian)如何能夠(gou)測量

多(duo)種(zhong)應(ying)用(yong)中(zhong)的芳香標記(ji)物(wu)的(de)吸光度，同時(shi)確信在(zai) 測量樣品(pin)吸光度時(shi)不會(hui)發生光(guang)漂(piao)白(bai)。

前言

在(zai)紫(zi)外(wai)-可見分(fen)光光度法的多(duo)種(zhong)應(ying)用(yong)中(zhong)，有許多(duo)光(guang)漂(piao)白(bai)標記(ji)物(wu)可供(gong)選擇(ze)，例如亞(ya)甲(jia)基 藍(lan)，這(zhe)是(shi)壹(yi)種用(yong)作(zuo)標記(ji)物(wu)的(de)三環(huan)雜(za)芳(fang)族(zu)化合(he)物(wu)。亞(ya)甲(jia)基藍(lan)特(te)

別(bie)容(rong)易發生光(guang)漂(piao)白(bai)1， 在監測許多(duo)物(wu)質(zhi)（例如 DNA）旋(xuan)轉(zhuan)動(dong)力學(xue)的瞬(shun)時(shi)光(guang)致(zhi)二向色性實(shi)驗(yan)中(zhong)用作(zuo)標準外(wai) 在(zai)探針2。

在許多(duo)應(ying)用(yong)中(zhong)不希望(wang)出(chu)現光漂(piao)白(bai)，因為(wei)需要保留(liu)所用(yong)探(tan)針（或比(bi)色劑）的分(fen)光光度。這對於(yu)其(qi)他本(ben)身(shen)會(hui)引(yin)起光漂(piao)白(bai)的紫(zi)外(wai)-可見光儀器可

能相(xiang)當(dang)困難(nan)。在(zai)本篇(pian) 綜述中(zhong)，我(wo)們(men)將展示(shi) Cary 60 紫(zi)外(wai)-可見分(fen)光光度計如何利(li)用(yong)光(guang)學(xue)設計和(he)脈沖 氙(xian)燈(deng)技術(shu)使三環(huan)雜(za)芳(fang)族(zu)化合(he)物(wu)不發生光(guang)

漂(piao)白(bai)。

儀器和(he)材料(liao)

G6860AA           Cary 60 紫(zi)外(wai)-可見分(fen)光光度計，配(pei)置 WinUV 軟(ruan)件(jian)和計算(suan)機(ji)

方(fang)法(fa)和(he)結果(guo)

用 3 mL 純化水在(zai)壹(yi)次性(xing)比(bi)色皿中(zhong)通過 Cary WinUV 掃(sao)描(miao)應(ying) 用(yong)程(cheng)序得到壹(yi)條基線(xian)（空白(bai)）。然後(hou)，記(ji)錄 10 次(ci)疊加(jia)掃描(miao) 的(de)數據，如圖(tu) 1 所(suo)

示(shi)，其(qi)目的(de)如下(xia)：1) 確定(ding)動(dong)力學(xue)研究(jiu)的最(zui) 大(da)吸收波長(chang)；2) 檢查 Agilent Cary 60 紫(zi)外(wai)-可見分(fen)光光度計 的(de)重(zhong)現性。

圖(tu) 1. 亞(ya)甲(jia)基藍(lan)水(shui)溶液  (20 ppm) 的 10 次疊加(jia)波長(chang)掃(sao)描(miao)。如圖(tu)所(suo)示(shi)，掃(sao)描(miao)重(zhong)疊，證實(shi)了(le) Cary 60 紫(zi)外(wai)-可見風光光(guang)度計具(ju)有高度的準

確性(xing)，而(er)且樣品(pin)未(wei)發生任(ren) 何光漂(piao)白(bai)

確定(ding)吸收峰(feng)值(zhi)為 664 nm（圖(tu) 1）後，按照(zhao) Kok 等人1  的(de)方(fang)法(fa) 設(she)置儀器重(zhong)復獲取(qu)數據，不同(tong)之(zhi)處在(zai)於(yu)在本例中(zhong)，我(wo)們(men)將暴 露(lu)時(shi)間(jian)從(cong) 10 分(fen)鐘

延(yan)長(chang)到 20 分(fen)鐘，以進(jin)壹(yi)步評(ping)估 Agilent Cary 60 對亞(ya)甲(jia)基藍(lan)的(de)任何光漂(piao)白(bai)作(zuo)用(yong)。結果(guo)如圖(tu) 2 所(suo)示(shi)。

圖(tu) 2. 在(zai) 664 nm 處每 12.5 ms 讀取(qu)亞(ya)甲(jia)基藍(lan) (20 ppm) 的(de)連續(xu)動(dong)力學(xue)吸光度值(zhi)

盡管(guan)連續(xu)照(zhao)射(she)了(le)長(chang)達(da) 20 分(fen)鐘，但圖 1 和圖 2 都(dou)表明沒(mei)有檢 測(ce)到亞甲(jia)基藍(lan)的(de)光降(jiang)解(jie)。相(xiang)比(bi)之(zhi)下(xia)，在 Kok 等人1 的(de)報導中(zhong) 可以發現，在測(ce)量亞甲(jia)

基藍(lan)時(shi)隨(sui)著時(shi)間(jian)的(de)推(tui)移出(chu)現了(le)明顯 的(de)光(guang)漂(piao)白(bai)。結果(guo)表明，在研(yan)究(jiu)將三環(huan)雜(za)芳(fang)族(zu)化合(he)物(wu)用(yong)作(zuo)比(bi) 色指(zhi)示(shi)劑或存(cun)在光漂(piao)白(bai)問題(ti)的(de)系(xi)統時(shi)，Cary 60 紫(zi)

外(wai)-可見 分(fen)光光度計是(shi)理想之選。

結論(lun)

以上(shang)數據表明，新的(de) Agilent Cary 60 紫(zi)外(wai)-可見分(fen)光光度計 不會(hui)引(yin)發光(guang)敏(min)樣品(pin)的光降(jiang)解(jie)，通過其(qi)脈沖(chong)氙(xian)燈(deng)進(jin)行 測量可確保(bao)結果(guo)始終(zhong)可測、

準(zhun)確和(he)重(zhong)現。