Cary 8454 和 Cary 60 紫(zi)外-可見分光光度(du)計進行(xing)測定的(de)比較

                                                              采用 Cary 8454 和 Cary 60 紫(zi)外-可見 分光光度(du)計

進行(xing)測定的(de)比較

前言(yan)

方(fang)法(fa)開(kai)發(fa)和驗證(zheng)用於(yu)證(zheng)明所有新(xin)儀(yi)器(qi)在現有儀(yi)器(qi)的操(cao)作(zuo)範(fan)圍(wei)和可接受標(biao)準內，能夠 提(ti)供(gong)相(xiang)同的(de)結(jie)果。將方(fang)法(fa)從壹臺(tai)儀(yi)器(qi)轉(zhuan)移(yi)至(zhi)另(ling)壹臺(tai)儀(yi)器(qi)時，驗證(zheng)要求取決(jue)於 GMP 指(zhi) 南(nan)，來確保(bao)結(jie)果的壹(yi)致性和重現性。

本(ben)研究展(zhan)示了(le)在使用紫(zi)外-可見 ChemStation 軟件的 Cary 8454 紫(zi)外-可見分光光度(du)計 與(yu)使用 Cary WinUV 軟件的 Cary 60 紫(zi)外-可見分光光度(du)計之間的(de)方(fang)法轉(zhuan)移(yi)。同時(shi)通過(guo) 對比證(zheng)明了(le)兩種分光光度(du)計系統(tong)結(jie)果的準確性和重現性。方(fang)法的(de)任(ren)何(he)其(qi)他驗(yan)證(zheng)要求 均(jun)需要滿(man)足法(fa)規(gui)指(zhi)南和可接受標(biao)準。

實(shi)驗部(bu)分(fen)

設備

–     Cary 8454 紫(zi)外-可見分光光度(du)計

–     紫(zi)外-可見 ChemStation 軟件

–     Cary 60 紫(zi)外-可見分光光度(du)計

–     Cary WinUV 軟件

試劑

–      空白溶(rong)液：    0.00 mg/L 高(gao)氯酸空白

–      標(biao)準溶(rong)液：    40 mg/L、80 mg/L 和 120 mg/L 重鉻酸鉀(jia)

–      樣品(pin)溶(rong)液：    約(yue) 75 mg/L 重鉻(ge)酸鉀(jia)

第(di) 1 部分(fen)：確定分(fen)析波(bo)長

使用 40 mg/L 的重(zhong)鉻(ge)酸鉀(jia)樣品(pin)確(que)定合(he)適的波(bo)長，並使用 Cary  8454 和 Cary 60 紫(zi)外-可見分光光度(du)計在該波(bo)長下生成校(xiao)準曲線(xian)。

儀(yi)器(qi)參數：Cary 8454

–      ChemStation 軟件：    標(biao)準模(mo)式(shi)，光譜/峰(feng)任務(wu)

–      波(bo)長顯示(shi)：                  200–800 nm

–      積(ji)分(fen)時(shi)間(jian)：                 0.5 秒(miao)

–      峰/峰(feng)谷查找(zhao)：             查找(zhao)並(bing)標(biao)註(zhu)最多(duo)兩個峰

儀(yi)器(qi)參數：Cary 60

–      WinUV 軟件：             “掃(sao)描(miao)"應(ying)用程序

–      波長顯示(shi)：                  200–800 nm

–      掃(sao)描(miao)速度(du)：                  高級設置：數據間隔 3 nm

–      基(ji)線(xian)：                        所選(xuan)校(xiao)正(zheng)

–      峰(feng)信息：                      峰閾(yu)值(zhi) 0.010 ，X 標(biao)註(zhu)（圖(tu) 1）

圖(tu) 1. 在 Cary WinUV 設置菜(cai)單(dan)中(zhong)設置峰標(biao)註(zhu)

方法(fa)

開(kai)啟(qi) Cary 8454 紫(zi)外-可見分光光度(du)計，將燈(deng)預(yu)熱壹小(xiao)時。在 預(yu)熱過(guo)程(cheng)中(zhong)，打(da)開紫(zi)外-可見 ChemStation 軟件，選(xuan)擇“標(biao)準 模(mo)式(shi)"進行(xing)分析並(bing)輸入參數。預(yu)熱後，使用高氯(lv)酸空白進行(xing)空 白讀(du)數。使用 40 mg/L 高氯(lv)酸溶(rong)液采(cai)集單(dan)個光譜(pu)， 從(cong)而(er)確(que)定 分(fen)析波(bo)長。

Cary 60 紫(zi)外-可見分光光度(du)計不需要預(yu)熱。打(da)開 Cary WinUV 軟件，選(xuan)擇“掃(sao)描(miao)"應(ying)用程序並輸入參數。使用高氯(lv)酸空白進 行(xing)基(ji)線(xian)采集(ji)，然後采集 40 mg/L 重鉻(ge)酸鉀(jia)溶(rong)液的(de)掃(sao)描(miao)結(jie)果。

結(jie)果

在 Cary 8454 紫(zi)外-可見分光光度(du)計和 Cary 60 分光光度(du)計上(shang)采 集(ji)的重鉻(ge)酸鉀(jia)譜(pu)圖(tu)具(ju)有高(gao)度(du)重現性，且(qie)在 257 nm 和 350 nm 處鑒定出(chu)了(le)相(xiang)同的(de)峰(feng)（圖(tu) 2a 和 2b）。

圖(tu) 2a. 展(zhan)示重鉻酸鉀(jia)光(guang)譜的(de)紫(zi)外-可見 ChemStation 軟件，圖(tu)中(zhong)在 257 nm 和

350 nm 處鑒定出(chu)兩個峰。采(cai)集(ji)自 Cary 8454 紫(zi)外-可見分光光度(du)計

圖(tu) 2b. 展(zhan)示重鉻酸鉀(jia)光(guang)譜的(de) Cary WinUV 軟件，圖(tu)中(zhong)在 257 nm 和 350 nm 處 鑒定出(chu)兩個峰。采(cai)集(ji)自 Cary 60 分(fen)光光(guang)度(du)計

第(di) 2 部分(fen)：確定未(wei)知(zhi)樣品(pin)濃(nong)度(du)

在 Cary 8454 紫(zi)外-可見分光光度(du)計和 Cary 60 中使用三(san)種(zhong)重(zhong) 鉻(ge)酸鉀(jia)標(biao)準溶(rong)液生(sheng)成校(xiao)準曲線(xian)。選(xuan)擇的(de)分析波(bo)長為(wei) 350 nm。

儀(yi)器(qi)參數：Cary 8454（圖(tu) 3）

–      ChemStation 軟件：      標(biao)準模(mo)式(shi)，定量(liang)分析任(ren)務(wu)

–      波(bo)長：                           350 nm

–      背景校(xiao)正(zheng)：                    無(wu)

–      校(xiao)準曲線(xian)類(lei)型：            線(xian)性

–      重(zhong)量：                           單(dan)位(wei)為(wei) mg/L 與(yu)體積(ji)校(xiao)正(zheng)

–      提(ti)示(shi)：                          用(yong)於(yu)標(biao)準品(pin)和樣品(pin)信息

圖(tu) 3. 紫(zi)外-可見 ChemStation 標(biao)準模(mo)式(shi)定量(liang)分析任(ren)務(wu)中(zhong)的方法參(can)數

儀(yi)器(qi)參數：Cary 60（圖(tu) 4）

–      WinUV 軟件：      “濃度(du)"應用程(cheng)序

–      波長：                 350 nm

–      標(biao)準品(pin)設置：       單(dan)位(wei)為(wei) mg/L ，3 種(zhong)標(biao)準品(pin)，線(xian)性擬(ni)合

–      重復次(ci)數：           2 次(ci)

圖(tu) 4. Cary WinUV“濃(nong)度(du)"應用程(cheng)序設置菜(cai)單(dan)中(zhong)的方法(fa)參數

方法

在兩種儀(yi)器(qi)中均(jun)使用高氯(lv)酸空白進行(xing)空白讀(du)數。對 40 mg/L、 80 mg/L 和 120 mg/L 高氯酸溶(rong)液進行(xing)單(dan)次(ci)測(ce)定，生(sheng)成校(xiao)準曲 線(xian)。然後(hou)對未(wei)知(zhi)樣品(pin)進行(xing)測定。

結(jie)果

根(gen)據生成的壹(yi)條校(xiao)準曲線(xian)，使用 Cary 8454 紫(zi)外-可見分光光 度(du)計測定的(de)未(wei)知(zhi)重鉻(ge)酸鉀(jia)溶(rong)液的(de)濃度(du)為(wei) 77.5 mg/L（圖(tu) 5）， 使用 Cary 60 測定的(de)濃度(du)為(wei) 77.4 mg/L（圖(tu) 6），表(biao)明兩種系統(tong) 能夠(gou)獲得(de)相(xiang)當的(de)結(jie)果。

圖(tu) 5. 展(zhan)示樣品(pin)/結(jie)果表的(de)紫(zi)外-可見 ChemStation 軟件，其(qi)中未(wei)知(zhi)重鉻(ge)酸鉀(jia)樣品(pin) 濃(nong)度(du)為(wei) 77.5 mg/L

圖(tu) 6. Cary WinUV 軟件濃度(du)應用程(cheng)序分析報(bao)告(gao)，展(zhan)示重鉻酸鉀(jia)未(wei)知(zhi)樣品(pin)（樣品(pin) 1） 的(de)濃(nong)度(du)為(wei) 77.4 mg/L

結(jie)論(lun)

Cary 8454 紫(zi)外-可見分光光度(du)計和 Cary 60 系統(tong)均(jun)分析快(kuai)速且(qie) 簡單(dan)易(yi)用。如本研(yan)究所示，兩種系統(tong)均(jun)有可(ke)輕松(song)進行(xing)方法開(kai)發(fa) 的軟件，能夠實(shi)現常(chang)規(gui)紫(zi)外-可見方法的快(kuai)速設置。

從 Cary 8454 紫(zi)外-可見分光光度(du)計到 Cary 60 紫(zi)外-可見分光 光度(du)計的兩種方法的轉(zhuan)移(yi)結(jie)果證(zheng)明，可(ke)實(shi)現重現性峰(feng)采集(ji)以及(ji) 準確的標(biao)準品(pin)和樣品(pin)測(ce)定。

本(ben)研究分析結(jie)果表明，Cary 60 紫(zi)外-可見分光光度(du)計（也(ye)支持(chi) 可選(xuan)的 21 CFR Part 11 軟件工具）的(de)性(xing)能(neng)，可確(que)保(bao)法(fa)規(gui) 監(jian)管實(shi)驗室在使用 Cary 60 執行(xing)之前為(wei) 8453 或(huo) 8454 儀(yi)器(qi)開 發的方法(fa)時充(chong)滿(man)信心(xin)。